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骨關(guān)節結核的臨床診斷主要依據臨床表現和輔助檢查的X線(xiàn)片及CT片,但病原學(xué)診斷還需依賴(lài)細菌學(xué)檢驗。但因為長(cháng)期應用抗結核藥物及取材、培養等因素,使細菌培養的陽(yáng)性率很低,一般不超過(guò)20%,而且培養的時(shí)間也較長(cháng),需要3~8周隨著(zhù)生物技術(shù)的發(fā)展,聚合酶鏈反應(PCR)的誕生,國外很多學(xué)者已將PCR技術(shù)應用于骨關(guān)節結核的病理診斷中,并收到了優(yōu)良效果,現已有標準的模板結核DNA及相應的引物合成試劑,應用簡(jiǎn)單。其實(shí)驗方法為取一2mm3大小的結核組織塊加入 Mris、NaOH、SDS等制成乳劑,經(jīng)煮沸、離心及苯芬***/異戊醇混合液提取,NaAC和無(wú)水乙醇沉淀后,進(jìn)行PCR擴增,再于1.2g%瓊脂糖凝膠電泳,然后于紫外燈下觀(guān)察色帶。PCR擴增法檢測的是結核菌中細胞核內的D)NA,其陽(yáng)性敏感率較細菌培養法大大提高,而且微量細菌或已被殺死細胞的LNA存在,就可以檢測出來(lái),也就是說(shuō)只要檢測物中含有結核菌的DNA,即可擴增出!DNA的特異片段。因此,檢測物中即使無(wú)活細菌或檢測物是經(jīng)過(guò)固定液固定后,均不影響檢測結果。而且PCR擴增技術(shù)僅需2天就可以報告結果,大大縮短了檢測時(shí)間,為臨床診斷提供了重要依據。
由上述可見(jiàn),PCR技術(shù)的應用具有敏感、快速、高效、特異等優(yōu)點(diǎn),是一種在基因水平上診斷結核的技術(shù),對各種骨關(guān)節結核的診斷和鑒別診斷具有特殊意義。