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腫瘤標志物檢測方法

2012-08-27 09:48 閱讀:3439 來(lái)源:愛(ài)愛(ài)醫 責任編輯:潘樂(lè )樂(lè )
[導讀] 同一個(gè)標志物可用不同方法進(jìn)行檢測,如可以從血清學(xué)水平、免疫組化檢測CEA或P-gp等,也可以用FCM或RT-PCR來(lái)檢測。 血清學(xué)水平:除傳統的放射免疫分析(RIA)和酶聯(lián)免疫分析(ELISA)外,目前在國內主要有三類(lèi)全自動(dòng)免疫化學(xué)分析系統(化學(xué)發(fā)光免疫分析系統;

    同一個(gè)標志物可用不同方法進(jìn)行檢測,如可以從血清學(xué)水平、免疫組化檢測CEA或P-gp等,也可以用FCM或RT-PCR來(lái)檢測。

    血清學(xué)水平:除傳統的放射免疫分析(RIA)和酶聯(lián)免疫分析(ELISA)外,目前在國內主要有三類(lèi)全自動(dòng)免疫化學(xué)分析系統(化學(xué)發(fā)光免疫分析系統;熒光免疫分析系統和電化學(xué)發(fā)光免疫分析系統)廣泛的應用于臨床,對血清腫瘤標記物檢測具有快速、準確、半定量。可檢測AFP、CEA、CA19-9、CA72-4、CA125、CA15-3、NSE、Cyfra21-1、PSA、f- PSA等。

    組織學(xué)水平:免疫組化和原位分子雜交組化技術(shù)是近年發(fā)展起來(lái)的一門(mén)新興邊緣學(xué)科。它將免疫學(xué)技術(shù)和分子生物學(xué)技術(shù)同組織病理學(xué)制片方法巧妙結合在一起,在組織細胞原位顯示某些化學(xué)成分和特定基因片段。

    常規標本中約5%~15%疑難病例或惡性腫瘤需采用免疫組化進(jìn)行鑒別診斷和預后分析。

    Porter D利用mRNA原位雜交檢測細胞水平基因表達,在組織芯片上免疫組織化學(xué)檢測乳房導管原位癌和浸潤癌病理學(xué)特征和臨床意義。

    圖像分析技術(shù)可以定量測定組織切片上腫瘤細胞DNA含量和形態(tài)學(xué)分析,對判斷腫瘤惡性度及預后具有重要臨床價(jià)值。

    細胞學(xué)水平:流式細胞術(shù)(Flow Cytometry, FCM)。是利用FCM對細胞和細胞器的結構和某些功能進(jìn)行定量檢測,并利用細胞表面特異性標志對特定細胞亞群進(jìn)行分析和分選的先進(jìn)技術(shù)方法。檢測白血病和淋巴瘤標記物(CD系列)利于診斷和鑒別診斷;用FCM檢測惡性腫瘤細胞的P-gp可為臨床選擇化療藥物提供依據;我們用FCM檢測消化道腫瘤外周血CD44水平。

    電鏡:電鏡酶細胞化學(xué)技術(shù)、免疫電鏡技術(shù)、原位雜交電鏡技術(shù)。

    分子學(xué)水平:聚合酶鏈反應法(PCR)是一種極為簡(jiǎn)單、敏感、高效、特異和快速的能在體外進(jìn)行擴增DNA的技術(shù)。

    目前,國內外用RT-PCR方法檢測外周血中的腫瘤細胞的主要標記基因有細胞角蛋白19(CK19 mRNA)和20(CK20mRNA)用于上皮性惡性腫瘤;癌胚抗原(CEAmRNA)用于結直腸癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌等CEA分泌性腫瘤;甲胎蛋白( AFPmRNA)用于肝細胞癌微轉移的檢測。

    生物芯片分析系統:①基因芯片。我們做了卵巢癌和食管癌基因表達譜的研究工作。Zhu G報道用顯微切割和芯片技術(shù)結合分析乳房癌不同部位腫瘤細胞之間基因表達差異。②組織芯片。組織芯片可以幫助節省試劑、人力和費用。過(guò)去分析一個(gè)腫瘤的試劑量現在可以分析高達數百個(gè)甚至1000個(gè)腫瘤,而且是在同一張切片上同時(shí)進(jìn)行。③蛋白芯片。為多標志聯(lián)合檢測提供了理想的工具,英國RANDOX公司已經(jīng)在全球同時(shí)推出的包含8種腫瘤標志的蛋白芯片。


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