“十二五”863計劃生物和醫藥技術(shù)領(lǐng)域“基于DNA條形碼的快速檢測與分類(lèi)關(guān)鍵技術(shù)”主題項目于2012年初正式啟動(dòng)。該項目選擇我國珍稀藥用物種資源、野生物種資源、主要農作物資源和環(huán)境指示型生物等為研究對象,研制DNA條形碼檢測技術(shù)和相關(guān)試劑產(chǎn)品,構建上述生物物種的基因條形碼標準數據庫,建立我國重要生物遺傳資源的DNA條形碼網(wǎng)絡(luò )服務(wù)體系及基于DNA條形碼技術(shù)的快速檢測方法和分類(lèi)平臺,對保護我國重要物種資源、監測農業(yè)和森林環(huán)境系統、防止珍貴物種資源流失及外來(lái)物種入侵等具有重要意義。
項目實(shí)施一年來(lái),各項研究任務(wù)按計劃有序推進(jìn)。目前,項目已經(jīng)組織了100多人次的野外考察研究,針對淡水、森林和農業(yè)生態(tài)系統開(kāi)展了樣品采集和保藏工作,獲取各類(lèi)樣品達5097份。為了滿(mǎn)足大規模樣品DNA測序的需求,項目研究人員針對GFF法提取DNA的實(shí)驗條件進(jìn)行了大量探索,實(shí)現了高通量、低成本、高質(zhì)量的DNA提取技術(shù),實(shí)驗室的年標本處理能力將達到2萬(wàn)條;同時(shí),還建立了ITS2+psbA-trnH、COI為主,matK、rbcL和ITS2為輔的樣品快速PCR擴增技術(shù)體系以及基于二代測序為主的海量DNA條形碼數據獲得技術(shù)體系,為基因條形碼標準數據庫的構建奠定了堅實(shí)的基礎。針對國內中藥材市場(chǎng)上冬蟲(chóng)夏草存在偽品現象,項目開(kāi)展了DNA條形碼技術(shù)快速鑒別冬蟲(chóng)夏草及其混偽品、近緣物種的技術(shù)研究,研究結果顯示,應用BLAST1和Nearest genetic distance兩種方法ITS條形碼的鑒定效率可達100%,能快速有效區分冬蟲(chóng)夏草與其混偽品和近緣種。此項技術(shù)的推廣將有利于我國冬蟲(chóng)夏草等珍稀中藥材市場(chǎng)的規范化建設和貿易監管,具有很高的示范應用價(jià)值。
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