血清乙肝標志物(兩對半)定性測定始于80年代中期,對乙肝的疾病診斷、病程監測、療效觀(guān)察起到了一定的作用。隨著(zhù)臨床醫學(xué)的迅速發(fā)展,定性檢測已遠遠不能滿(mǎn)足臨床及患者的要求。由于受檢測抗原抗體定性結果不是“陽(yáng)性”就是“陰性”,無(wú)法動(dòng)態(tài)觀(guān)察病情和療效的變化,所以,為臨床所能提供的信息有限。隨著(zhù)檢驗醫學(xué)的發(fā)展,“兩對半”定量測定成為可行,大大彌補了酶標(ELISA)定性檢測的不足。同時(shí),兩對半的定量檢測可與血清HBV-DNA熒光定量PCR測定相互補充,綜合評價(jià)患者病情與藥物療效。
一、兩對半定量檢測極大的提高了檢測的靈敏度。
雅培化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)(Chemiflex)檢測HbsAg靈敏度可達0.1ng/ml,而酶標(ELISA)檢測HBsAg的靈敏度達到2ng/ml酶標才會(huì )呈陽(yáng)性。
1、急性乙肝早期:(Chemiflex)定量能及早檢出HBsAg,確證HBV感染,幾乎能與preS1同時(shí)檢測,在病程觀(guān)察中大大縮短了“窗口期”時(shí)間,而酶標檢測在乙肝早期檢測往往HBsAg呈陰性。
2、慢性乙肝:一些患者由于機體常缺乏對HBV包膜蛋白的免疫應答,HBsAg表達較低,酶標檢測可出現HBsAg和HbsAb均陰性的情況,而(Chemiflex)定量檢測則可避免這些情況的出現,為正確判斷病情提供依據。
3、如病毒發(fā)生變異后,表達量較低,常規ELISA測不出抗原,而(Chemiflex)定量檢測具有極高的靈敏度,可發(fā)現并極有可能同時(shí)檢測出HBsAg和HbsAb。國內外學(xué)者研究表明HBsAg的免疫應答與肝細胞損傷有一定關(guān)系。血清中HBsAg含量和病人對HBsAg細胞免疫成反比關(guān)系,而肝功能改變則與此種細胞免疫成正比。定量HBsAg是反應這一關(guān)系的唯一手段。
4、可發(fā)現低濃度的HBsAg攜帶者。特別是一些群體如醫護工作者、病人家屬等,由于長(cháng)期密切接觸,但又非直接經(jīng)血傳播感染成急性乙肝,而是長(cháng)期少量感染,并刺激機體產(chǎn)生一定的免疫力,可能呈低濃度感染,特別應當引起人們的足夠重視,密切關(guān)注并采取措施防止發(fā)展成乙肝或慢性攜帶者。
二、以動(dòng)態(tài)觀(guān)察療效和病情監測
疾病的發(fā)生、發(fā)展、療效、預后是一個(gè)動(dòng)態(tài)的變化的過(guò)程,(Chemiflex)定量檢測乙肝“兩對半”各項標志物的濃度變化可對乙肝的病程、治療、預后起一個(gè)全程動(dòng)態(tài)檢測的作用,能夠為醫生對病情療效作出合理的解釋提供依據,指導治療。
1、定量分析HBsAg和HbsAb的濃度變化,可以預見(jiàn)急性乙肝是否處于恢復期。如HBsAg濃度降低,HBsAb的濃度逐漸升高,可說(shuō)明病情正往恢復期發(fā)展。反之,HBsAg濃度處于較高水平或上升趨勢,而HBsAb一直處于較底水平,則容易發(fā)展為慢性乙肝或攜帶者。
2、定量分析HBeAg和HBeAb的濃度變化,可以反應病情變化和治療效果。定量測定能明確檢測HBeAg向HBeAb轉換的時(shí)期,即表現為HBeAg濃度(NCU)下降和HBeAb濃度(NCU)升高的過(guò)程。高濃度的HBeAg還可間接提示病毒處于高復制狀態(tài),具有較高的傳染性。高濃度的HBeAb一方面提示病情的好轉,而在某些時(shí)候(如肝功能指標很差)可能與肝壞死、肝硬化、肝癌有關(guān)。
3、HBcAb濃度的高低可以反應病毒感染的狀態(tài)。高濃度的HBcAb提示乙肝急性感染,恢復期濃度降低。慢性乙肝呈HBcAb持續高濃度。而低濃度的HBcAb一般為恢復期或既往感染。
4、有利于對慢性肝炎活動(dòng)性和非活動(dòng)性的判斷。非活動(dòng)性慢性乙肝各項指標相對穩定,活動(dòng)性往往呈進(jìn)行性變化。
5、慢性乙肝的分類(lèi):根據對HBV-DNA前C基因突變的研究,按HBeAg和HBeAb狀況分為兩大類(lèi)型:即HBeAg陽(yáng)性慢性肝炎,由于HBV野生型感染引起,其自然史分HBeAg陽(yáng)性期和HBeAb陽(yáng)性期。定量測定能明確檢測HBeAg向HBeAb轉化的時(shí)期,即表現為HBeAg濃度(NCU)的下降和HBeAb濃度(NCU)升高的過(guò)程。另一類(lèi)型HBeAb陽(yáng)性慢性肝炎主要由前C基因突變株HBV感染所致,也稱(chēng)異型慢性肝炎。始終不出現HBeAg,但HBV-DNA進(jìn)行性復制。HBsAg亦在高濃度處變動(dòng)。與前者HBeAg陽(yáng)性慢性肝炎中的轉化期比較,“兩對半”定性均表現為小三陽(yáng),但后者主要表現在高HBsAg濃度,忽高忽低的ALT值和HBV-DNA始終陽(yáng)性。這類(lèi)病人往往對干擾素、拉米呋啶治療效果不佳。
三、血清HBV-DNA熒光定量PCR測定可以直接反應病毒復制狀態(tài),具有很多臨床應用價(jià)值,但不能完全反應病毒復制靜息期肝細胞內HBV病毒狀態(tài)。
HBV-DNA陰性并不完全代表體內HBV已被清除,結合“兩對半”各項指標更能客觀(guān)反應體內HBV病毒狀態(tài),正確判斷預后及治療。
如果HBV-DNA陰性而HBsAg、HBeAg或HBeAb及HBcAb濃度均還較高,提示并未完全痊愈,有可能病毒再次出現復制狀況,尚須密切關(guān)注。如果HBV-DNA陰性而HBsAg、HBeAg或HBeAb及HBcAb濃度均很低或陰性并持續一段時(shí)間,提示可能完全痊愈,預后療效良好。
四、HBsAb的定量測定能夠對抗體是否真正具有“中和”HBV的免疫力作出正確評價(jià),對乙肝的預防起到監督作用
HBsAb的含量在10mIU/ml以上病人在用ELISA檢測就可呈HbsAb陽(yáng)性結果,但并不提示機體都一定具有免疫力,而HBsAb的含量在10-100mIU/ml之間的樣本,定性雖為陽(yáng)性,但此時(shí)機體對HBV的免疫力較弱,甚至不能預防HBV感染,仍有感染HBV的危險。只有HBsAb的含量達到100mIU/ml以上時(shí)才可確定具有抵抗HBV入侵的作用。HBsAb的含量越高,機體抵抗HBV入侵能力越強,持續時(shí)間越長(cháng)。作定量測定,根據HBsAb的含量可判斷機體對HBV的免疫狀態(tài)及乙肝疫苗的免疫效果,HBsAb的含量較低,應該加強注射一針乙肝疫苗,使HBsAb的濃度提高起到保護作用。同時(shí),乙肝疫苗接種后機體產(chǎn)生免疫力因個(gè)體差異而不同,有的可產(chǎn)生高濃度的抗體并持續數十年。而有的人產(chǎn)生的抗體濃度不是很高,且持續時(shí)間也不長(cháng),數年后就逐漸消失,這部分人應及時(shí)關(guān)注HBsAb濃度變化,必要時(shí)也應加強注射一針乙肝疫苗(但也有人認為機體在受到病毒感染時(shí),會(huì )產(chǎn)生記憶反應,迅速提高免疫力)。因此定量測定乙肝疫苗免疫力的評價(jià)和高危人群預防免疫具有重要意義,特別是在少年兒童預防乙肝方面。
在慢性肝病的治療過(guò)程中,病人對了解自己病情的變化最為關(guān)切。定量測定乙肝血清標志物的濃度使病人能夠對自己的病情有更清楚的了解,提高治療信心,同時(shí)也加強了醫生的信任度,有助于改善醫患關(guān)系,利于疾病治療。
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