最近,成都中醫藥大學(xué)、都江堰醫學(xué)中心和成都諾恩生物科技有限公司(Nuoen)的研究人員,開(kāi)發(fā)出一種最新的miRNA檢測方法,可以幫助我們把microRNA轉變成為強大的診斷標志物,并減少不適當的抗生素處方。
作為各種各樣疾病的一種重要調節分子,microRNAs(miRNAs)用作非侵入性診斷生物標志物,已經(jīng)顯示出巨大的潛力,可能有一天被用于早期診斷和預后。然而,目前還沒(méi)有一種miRNAs檢測方法已被證明足夠可靠地應用于臨床。
這種新的miRNA檢測方法——命名為miRNA衍生片段長(cháng)度多態(tài)性(miRFLP),可以快速、準確地驗證體液標本中的miRNA標記,以用于臨床設置的疾病診斷。這一研究結果發(fā)表在最近的Nature子刊《Scientific Reports》。
本研究負責人徐凱(Kai Xu)指出:“相比較其他方法,miRFLP法為我們提供了一種可靠的miRNA檢測方法,是唯一能夠在不同種類(lèi)粗樣品中直接檢測microRNA拷貝數的方法。這使我們能夠在24小時(shí)的時(shí)間框架內,為患者提供測試結果。”
徐凱的研究小組發(fā)現,特定的miRNA往往通過(guò)在血液和其他體液中上調或下調,而反應各種不同的疾病。利用miRFLP技術(shù),該實(shí)驗室將可以將目標miRNA與合成RNA spike-ins組合,同時(shí)轉換成不同大小的DNA片段。通過(guò)同時(shí)測量miRNA和RNA spike-ins,實(shí)驗室可以從少量未純化的血液樣本中,直接獲得目標miRNA拷貝。
通過(guò)實(shí)驗,該研究團隊最終發(fā)現,只需要0.2毫升的血清,就能精確地檢測出低至每個(gè)樣本中一個(gè)拷貝的目標miRNA數量。
徐凱解釋說(shuō):“不同于其他的方法,我們利用PCR來(lái)同時(shí)擴增所有信號,利用毛細管電泳技術(shù)檢測不同大小的片段及其熒光。我們用它來(lái)制作一個(gè)標準曲線(xiàn),并測定每個(gè)目標microRNA數量,其余部分是一個(gè)程序,將它們轉換為真實(shí)副本。”
新的方法能提供一個(gè)有價(jià)值的非侵入性替代方法,很快檢測器官損傷、癌癥、糖尿病和許多其他疾病。根據徐凱介紹,miRFLP的第一個(gè)臨床試驗,將與哮喘密切相關(guān)的microRNA表達上調,與患者細菌或病毒感染相關(guān)的microRNA區分開(kāi)來(lái)。
徐凱說(shuō):“用一滴血,我們就可以告訴你是否患有哮喘、細菌感染或病毒感染。我們的測試法將給病人帶來(lái)很多好處,并避免濫用抗生素,這是一個(gè)全球問(wèn)題。”
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