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淋病的實(shí)驗室檢測

淋病是一種常見(jiàn)的性病，在我國有著(zhù)很高的感染人數，對人體有著(zhù)很大的危害，但近幾年來(lái)，從我國的淋病疫情數據分析中，揭示出很多的問(wèn)題，淋病的人數是有著(zhù)下降的趨勢的，并且男女比例有著(zhù)很大的差異，從數據分析來(lái)看，目前仍然存在著(zhù)淋病病例（特別是女性病例）發(fā)現不足，這個(gè)原因有很多，但檢測篩查的力度不足是一個(gè)重要的原因，很多的醫療機構，對淋病的檢測還有著(zhù)一些不正確的認識，下面就淋病的實(shí)驗室檢測做一個(gè)簡(jiǎn)單的分析。

一、淋病實(shí)驗室檢測方法

目前，我國淋病的實(shí)驗室常規檢測方法為：直接顯微鏡檢查淋球菌；分離培養淋球菌；核酸檢測。

1、直接顯微鏡檢查淋球菌：

在顯微鏡直接檢查中，染色是很重要的一步，染色方法一般常用的是革蘭氏染色，還有美蘭染液，姬姆薩染液，熒光抗體。革蘭染色為傳統方法，因簡(jiǎn)便、快捷及價(jià)廉，仍然為最廣泛采用的方法。革蘭染色將菌分為二大類(lèi)，即染成紫色的革蘭陽(yáng)性菌及染成紅色的革蘭陰性菌。

直接顯微鏡檢查的臨床意義：男性淋菌性尿道炎的尿道標本敏感性及特異性可高達95%～99%，具診斷價(jià)值；宮頸標本、無(wú)癥狀男性尿拭子及取自直腸的涂片時(shí)，敏感性?xún)H40～70%；不推薦直接顯微鏡檢查診斷直腸和咽部淋球菌感染；亦不能用于療后判愈；如果在多形核細胞外見(jiàn)到形態(tài)典型的革蘭陰性雙球菌，需做培養進(jìn)行確證。

2、淋球菌培養：

培養條件：35℃～36℃，含5%～10%CO2，濕潤（70%濕度）的環(huán)境。CO2環(huán)境可由CO2培養箱、CO2產(chǎn)氣袋及燭缸提供。使用燭缸時(shí)，應使用白色、無(wú)芳香味的無(wú)毒性蠟燭，在燭缸底部放些浸水棉球以保持一定的濕度。培養時(shí)間：24～48小時(shí)。

培養24小時(shí)后檢查平皿，此時(shí)沒(méi)有菌生長(cháng)的平皿應繼續培養至48小時(shí)，仍無(wú)菌生長(cháng)才可丟棄，作出淋球菌培養陰性的報告，對選擇性培養基上分離的直徑在0.5～1mm，無(wú)色、灰白色的半透明菌落應作進(jìn)一步鑒定。

對結果初步鑒定淋球菌的主要依據，一個(gè)是看菌落特征，還有就是氧化酶試驗，以及革蘭染色。

來(lái)自泌尿生殖道符合初步鑒定標準的分離株，一般可診斷為淋球菌，準確性達98%。對于菌落形態(tài)不典型的分離株，來(lái)自咽部、眼睛、或其他泌尿生殖道外部位的分離株，來(lái)自低危人群（如兒童）的分離株，以及涉及醫療法律案例的分離株，應作確證試驗。主要有糖發(fā)酵試驗或細菌自動(dòng)鑒定儀等。

分離培養法為淋病實(shí)驗室檢測的“金標準”，女性淋病患者，男、女直腸和咽部淋球菌感染培養的敏感性81～100%。特異性100%，可發(fā)現無(wú)癥狀淋球菌感染患者，可用于進(jìn)一步作藥敏試驗，可用于治療后的判愈試驗。

但大部分醫療機構的臨床上都不開(kāi)展培養，因為試驗需要一定的時(shí)間，而且整個(gè)試驗操作較為繁瑣，對醫生的確診來(lái)說(shuō)，花的時(shí)間過(guò)長(cháng)，不能及時(shí)給病人診斷和治療。

3、核酸檢測：

目前在我國，核酸檢測還在發(fā)展之中，還有待進(jìn)一步的完善，但這個(gè)檢測方法是未來(lái)的趨勢，在以后的工作中，一定會(huì )作為一種常規的檢測，以更加利于疾病的診斷。

核酸檢測一般有：經(jīng)典方法，實(shí)時(shí)熒光法，全自動(dòng)及快速法，目前國內大部分用的是熒光法。

它的特點(diǎn)是：敏感性、特異性高；不依賴(lài)于活的病原體的存在；無(wú)需特殊運送條件；可采用尿液等非侵入性標本；可以做多重項目的檢測。

核酸擴增檢測技術(shù)用于臨床診斷面臨的挑戰有：所需的儀器設備和試劑價(jià)格比較昂貴，在一般實(shí)驗室尚不能配備；不能做抗生素敏感性試驗；用于判愈試驗需在治療后至少3周以上。

二、標本的采集

淋病的檢測中，標本的采集尤其重要，如果沒(méi)有規范的采集好標本，對試驗的結果是有很大的影響的，可能會(huì )造成不正確的結果，對淋病的臨床確診做出錯誤的判斷。

從人群分類(lèi)采樣：

1、男性：異性戀者，采集尿道標本，有口淫史者加取咽部標本；同性戀者，采集尿道、直腸及咽部標本。

2、女性：采集宮頸標本，必要時(shí)從尿道、直腸、咽部、前庭大腺和尿道旁腺取材。

3、幼女：幼女和/或處女膜未破的感染者標本：采集陰道分泌物。

4、新生兒眼炎患者：采集眼結膜分泌物。

從采樣部位分類(lèi)：

1、尿道：男性患者，用手指從陰莖根部向尿道口方向擠壓，有癥狀患者可擠出膿液，用取樣拭子蘸取膿液作涂片或培養。對擠壓后無(wú)明顯分泌物時(shí)，采用男用取材拭子插入尿道2～3cm，稍用力轉動(dòng)，保留數秒鐘再取出，以采集到粘膜上皮細胞。

女性患者，可抵著(zhù)恥骨聯(lián)合輕輕按摩尿道口，擠壓出分泌物。如果無(wú)明顯分泌物，可用同男性相似的上述方法取材。

2、宮頸：避免使用防腐劑和潤滑劑，因為這些物質(zhì)對淋球菌有抑制作用。仔細檢查陰道壁和宮頸，如果宮頸口外面的分泌物較多，先用無(wú)菌棉拭清除過(guò)多的宮頸粘液。將一取樣拭子插入宮頸管內1～2cm，稍用力轉動(dòng)，保留10～30秒后取出。

3、眼部：用男性采樣拭子在眼結膜處蘸取分泌物或輕繞眼結膜。

4、直腸：將取樣拭子插入肛門(mén)2～3cm，從緊靠肛環(huán)邊的隱窩中取材，避免接觸糞便。

5陰道：青春期前女孩可采集陰道標本。將取樣拭子置于陰道后穹窿10～15秒，采集陰道分泌物。

6、咽部：從咽后壁或扁桃體隱窩取材。

三、藥敏試驗

近年來(lái)全球淋病流行趨勢嚴峻，淋病已成為全球公共衛生熱點(diǎn)，淋病的耐藥越來(lái)越引起重視，未來(lái)淋病的發(fā)展形勢嚴峻。

目前耐藥檢測監測技術(shù)面臨的挑戰：耐藥監測點(diǎn)的覆蓋面不全面，不能及時(shí)發(fā)現臨床治療失敗病例，臨床上不能精準規范用藥，對耐藥的科學(xué)研究開(kāi)展不足。

為了做好耐藥工作，我國制定了《遏制細菌耐藥國家行動(dòng)計劃（2016-2020年）》，進(jìn)一步加強抗菌藥物臨床應用管理。

目前耐藥方法有：瓊脂紙片擴散法（定性），Etest（定量），瓊脂稀釋法（定量），微量稀釋法（定量），全自動(dòng)細菌鑒定分析儀（定性），質(zhì)譜法（MALDITOF）（定性），分子生物學(xué)方法（定性）。一般常用的為瓊脂紙片擴散法和Etest。

1、瓊脂紙片擴散法：

特點(diǎn)：快速，簡(jiǎn)便，價(jià)廉，但只能用于定性，已經(jīng)有大量的商品化生產(chǎn)，可以及時(shí)指導臨床用藥。

2、Etest法：

特點(diǎn)：快速，簡(jiǎn)便，可以進(jìn)行定量，但價(jià)格高價(jià)高，也已經(jīng)有了商品化的生產(chǎn)。可以用于指導臨床用藥，同時(shí)可以作為耐藥的監測。